服務(wù)熱線
15022775827
一、實(shí)驗(yàn)方法
Cometro高效液相色譜系統(tǒng)；
紫外檢測器波長：278nm；
Kromasil C18 250*4.6mm 5u 色譜柱；
柱溫：25℃；
流動(dòng)相：0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺調(diào)pH=3.0）：乙腈=87:13；
流速：1.00ml/min；
諾氟沙星對(duì)照品-0.15mg/ml，樣品；
進(jìn)樣量：對(duì)照品分別進(jìn)樣5ul，7.5ul，10ul，12.5ul，15ul各3次，樣品進(jìn)樣10ul，使樣品與標(biāo)準(zhǔn)品1:1混合再進(jìn)樣10ul，考察線性相關(guān)性，保留時(shí)間重現(xiàn)性，回收率。
二、譜圖結(jié)果
附進(jìn)樣量，保留時(shí)間，峰面積關(guān)系表：
進(jìn)樣量 保留時(shí)間/min 峰面積/103 標(biāo)準(zhǔn)品5ul 10.533 728.12 標(biāo)準(zhǔn)品7.5ul 10.541 979.1 標(biāo)準(zhǔn)品10ul 10.528 1230.741 標(biāo)準(zhǔn)品12.5ul 10.524 1460.44 標(biāo)準(zhǔn)品15ul 10.401 1732.42 樣品10ul 10.517 1029.987 樣品標(biāo)準(zhǔn)品1比1混合10ul 10.213 1120.78
三、結(jié)果運(yùn)算
1、保留時(shí)間重現(xiàn)性考察：
|
保留時(shí)間 |
10.533 |
10.541 |
10.528 |
10.524 |
10.401 |
|
|
RSD |
0.5588% |
|||||
2、線性相關(guān)性考察及樣品含量計(jì)算：
以標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，得線性方程：
由此可算出樣品中諾氟沙星含量0.1205mg/ml。
3、回收率考察：
根據(jù)上面線性方程可算出混合后樣品含諾氟沙星0.1342mg/ml，而實(shí)際真值是0.1352mg/ml，因此得回收率為99.20%。
四、綜述
1、此三項(xiàng)考察綜合考察了Cometro 6000 PVW UV/VIS檢測器的吸收穩(wěn)定性，Cometro 6000 LDI泵的流量性，進(jìn)樣伐、進(jìn)樣針的性，Kromasil色譜柱的性。
2、本實(shí)驗(yàn)流動(dòng)相中三乙胺看似作用是調(diào)節(jié)pH，其實(shí)際作用是調(diào)整峰型，因?yàn)橹Z氟沙星有含氮極性基團(tuán)，在酸性環(huán)境中容易與色譜柱中的硅羥基產(chǎn)生靜電作用而拖尾，如下圖：
而三乙胺可以代替物質(zhì)與硅羥基作用，保證了物質(zhì)的峰型。因此調(diào)節(jié)pH時(shí)候得注意三乙胺的加入量，不能過少，可以直接加入適量三乙胺，再用磷酸調(diào)節(jié)pH。
聯(lián)系方式
郵件：sales@scienhome.com
