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色譜柱常見問題的成因和進行適當清洗的意義

時間:2016/8/24 14:39:28 點擊次數(shù):5915

色譜柱常見問題的成因
  1、硅羥基的死吸附:硅膠粒子表面存在硅羥基,這些硅羥基會吸附樣品和流動相中的很多物質(zhì),當吸附達到飽和時就會出現(xiàn)柱效下降、峰形劣化的現(xiàn)象。有些吸附是可逆的,可以通過清洗解決。
  2
、重金屬離子:重金屬以金屬氧化物的形式殘存在硅膠離子的表面,這些金屬氧化物很容易與其它化合物形成螯合物,使其被氧化,造成峰形劣化。
  3
、緩沖液中鹽的析出:當流動相中含有緩沖鹽溶液,而且分析結(jié)束后,如果沒有先用水進行沖洗,而是直接用純有機相沖洗,瞬間柱子中的微環(huán)境是高有機相、低水相。這是流動相中的緩沖鹽溶液極易析出鹽分,將柱子堵塞,使柱壓升高,柱效下降。
  4、色譜柱變干:如果對色譜柱保存不當,使色譜柱中的保存液全部揮發(fā),柱子內(nèi)部變干,造成色譜柱的損傷,會影響分離效果。
 

對色譜柱進行適當清洗的意義

部分色譜柱故障可以通過適時、適當?shù)那逑吹鹊浇鉀Q,恢復(fù)色譜柱的功能,延長色譜柱的使用壽命。
   具體的沖洗方法要根據(jù)實際情況做適當?shù)倪x擇和調(diào)整,不同的用戶和色譜產(chǎn)品廠商對自己的色譜柱會有不盡相同的處理方法。新柱在使用前應(yīng)先認真閱讀說明書及性能測試報告,了解柱子的性能指標。分析用的流動相往往與柱子的保存試劑不同,故在分析樣品之前,應(yīng)使用合適的試劑將柱子中的保存試劑清洗出來。要注意清洗用的流動相與保存容積的相容性。
   正相柱或稱極性色譜柱一般保存在正庚烷或正乙烷中。如果分析時的流動相含有極性溶劑,應(yīng)使用乙醇或異丙醇沖洗,流速0.1-0.3ml/min
,將保存液沖洗干凈后,再用流動相平衡。
   鈣柱等糖柱只能用純水作流動相進行沖洗,有機溶劑會造成色譜柱損壞,尤其要注意。
沖洗后可以記錄色譜柱的一些性能指標,如柱效、柱壓等,供以后參考。分析樣品前,要用流動相對色譜柱進行平衡,待基線平穩(wěn)后再進行分析。一般用流動相平衡的時間為30min,若系統(tǒng)中有鹽或水,平衡時間應(yīng)延長。

  琛航公司有近20年經(jīng)驗豐富的Scienhome色譜柱及保護柱填充技術(shù),同時代理Hamilton色譜柱(其中PRP-X100 陰離子交換色譜柱,貨號為79433為暢銷)、瑞典原裝進口Kromasil系列液相色譜柱、日本昭和shodex色譜柱等進口產(chǎn)品,滿足制藥企業(yè)、食品行業(yè)、質(zhì)檢部門實驗對液相色譜柱的嚴格要求。

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